化学发光试剂已经由最初的鲁米诺、异鲁米诺试剂,发展到光泽精、吖啶酯、AMPPD以及三联吡啶钌电化学发光试剂,技术上已经有了重大飞跃,在体外诊断技术中的占比已达到50%。化学发光免疫分析技术发展迅速,其基本的原理都是类似的。
化学发光免疫分析定义
反应体系中的某种物质的分子(如鲁米诺、吖啶酯),包括反应物、产物、中间体或荧光物质,吸收了反应所释放的能量而有基态跃迁至激发态,然后再次回到基态时,会将能量以热或者光的形式辐射出来,如辐射的是可见光则就是化学发光。将化学发光反应用于分析化学,根据某一时刻的发光强度或反应的发光总量来确定体系相应组分含量的分析方法,即为化学发光分析,与免疫反应结合则为化学发光免疫分析。
化学发光必要条件
一是反应能释放一定的能量,且能量可以被某种产物或中间体吸收,使之处于激发态;二是这种激发态物质具有一定的化学发光量子产率,或者可以将其能量有效地转移给某种荧光物质,产生光辐射。
化学发光现象的发现
1. 萤火虫体内的生物发光即是一种化学发光反应产生的。
2. 洛酚碱(三苯基咪唑)在碱性介质中被过氧化氢等试剂氧化时发出绿色的光。
3. 鲁米诺(3-氨基邻苯二甲酰肼)在碱性介质中氧化发光,氧化的条件可以是血迹(血红蛋白)、漂白剂等氧化剂,或者是过氧化物酶存在下的过氧化氢。
4. 光泽精(N,N-二甲基二吖啶硝酸盐)与过氧化氢反应产生化学发光
5. 吖啶酯碱性条件下呗过氧化氢氧化直接产生化学发光,此外还有三联吡啶钌的电化学发光等等。
多种类型的吖啶酯及其它试剂的发光标记物应用技术也日趋先进,化学发光分析不适用任何光源,避免了背景光杂散光干扰,灵敏度达到纳克级、皮克级或更高。德晟是化学发光试剂研发企业,可提供多种鲁米诺、吖啶酯等化学发光试剂。