UltiMate3000液相色谱的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱，因此固定相的粒度不可能太小(100μm～150μm左右)。分离后的样品是被分级收集后再进行分析的，使得液相色谱不仅分离效率低、分析速度慢，而且操作也比较复杂。直到20世纪60年代。发展出粒度小于10μm的固定相，并使用了高压输液泵和自动记录的检测器，克服了液相色谱的缺点，发展成UltiMate3000液相色谱。
UltiMate3000液相色谱开机前的准备工作：
1.检查设备电源、流路、信号连接是否完好。
2.流动相：配制相应的流动相，经0.45µm微孔滤膜抽真空过滤后，超声脱气15分钟，必须使用色谱纯的溶剂，水或缓冲盐溶液要用超纯水；盛放样品溶液和流动相所用的玻璃容器必须用超纯水清洗。
3.样品溶液：按方法取样或配制标准样品溶液，0.45µm滤膜过滤。
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